主题：水产养殖提问93（不断更新）乳酸菌自扩培商业化操作

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1、钟工新年好！我是从事虾苗幼体培育工作的。我也经常用Qw100+水产苷扩培用于幼体培育，有一定的效果。所以我计划向我的同行门出售这些产品，年前送一些给他们使用也有一定的效果。但相比于我们这边的某个乳酸菌产品(也是液体的)效果还是差了一些！同等用量下，主要从净水方面与虾苗的食料方面与虾苗消化道的变化方面来对比，有一定的差距！虽然其他产品的价格是高了点，但大家还是更愿意使用效果更好一点的产品。以前我也咨询过你们的技术员:用Qw100+水产苷+葡萄糖按操作扩培后正常情况下能做到多少cfu/mI？他们告诉我正常情况是3亿左右，好的话可以达到5亿。但我前段时间扩培了几批，取样去分析时都远没有达到这个数值。所以我认为是活菌数的不够所造成效果的差异(或者也有因为菌株的不同与其他原因)。所以我现在想向你咨询一下:1，为增加其活菌数，在扩培Qw100或其他菌种时是否可以添加使用MRs培养基？这样操作又应注意些什么？2，为了增强净水功能，扩培时加入靓水素或其他有净水功能的菌种，是否可以增强其净水功能？具体操作是怎样的？3，或者你们有什么好的办法能增加扩培液中的活菌数与增强其净水功能？劳烦你，诚望你的解答，望不吝指教！多谢！

  您好，我们推荐让养殖户自己扩培乳酸菌的方法，就是为了让养殖户得到廉价的乳酸菌培养液，据我的计算大概养殖户自己扩培生产1公斤的乳酸菌发酵液，只需要0.6元/公斤的原料成本，相比于市场上20元/公斤一瓶的液态产品，您自己可以判断一下，价格的差异是巨大的，一个是天价，一个是几乎可忽略不计的成本，这就是我们设计让养殖户自己扩培的初衷，让养殖户以最低的成本得到优质产品；
    但现在的问题是：成本低了，但养殖户自己扩培的条件是极差的，首先是没有灭菌，用的是生水，甚至是池塘水，培养基也不可能要求太复杂，强微水产苷用量也是极少的（虽然水产苷有极为丰富的细菌生长因子），配合葡萄糖的话，不如配合红糖来扩培，因为葡萄糖是没有微生物所需要的氮营养的（即蛋白胨肽，氨基酸等），也缺少微量元素矿物质，特别是养殖户只能静置培养，不能充入无菌空气来繁殖细胞，所以，这种养殖户自己培养的发酵液，一般培养得好的，最多也只是0.3-3亿/毫升的含量，培养的效果肯定是不如专业的公司，用专业的设备（灭菌，丰富的培养基组成，纯培养，充无菌空气）来生产的乳酸菌液的。
    我们之所以推荐养殖户用以上简单的培养基和方法来自己生产乳酸菌发酵液，一是为了让养殖户以最低的代价，用到好的乳酸菌活菌（新鲜培养的乳酸菌效果好），二是在实践中证明，这种方法，确实 能达到很好的养殖效果，达到了设计的初衷，达到了设计 的目的，养殖户目前 也普通接受了这种方式和方法，如果能配合缓释碳源，即用米糠麦麸为原料，加少量红糖，加少量强微水产苷，来扩培的发酵液，则效果更好，（米糠麦麸中含有丰富的微量元素和矿物质，以及碳水化合物，以及维生素等），特别是现代水产缺少碳源，这种发酵米糠麦麸液体的方法，已经也被更多的养殖户所接受了，但米糠麦麸的杂菌更多，也只能适用于养殖户自己新鲜培养好，马上就用完的方式，不适用于生产商品出售的模式（除非灭菌处理），；
    所以，如果要想自己扩培，并最大限度地增加活菌含量，并作为一种商品出售给同行用的商业化操作，可以尝试改善以下几点：
    一是要用红糖比葡萄糖更好（注意不要购买到假的红糖）；
    二是可以考虑充气培养（但充气并不是无菌空气，所以，必须充气培养两天后，停止充气，并要在15天以内用完为宜），充气培养可能污染杂菌的机会增加，所以，培养后要密封保存，并及时用完。
    三是如果采用充气培养的方法，就得增加接种量，例如加大一倍的接种量，以壮肠QW100（育苗专用菌）为例，按我们的方法是：壮肠QW100（育苗专用菌）取250克 + 20公斤红糖 + 300公斤水，密封发酵培养2～3天，即可使用，平时密封保存，但最好在20天内用完效果最好，最长保存期为30天。则您可以把壮肠QW100（育苗专用菌）的用量增加到500克，甚至更高，这样接种量可达到2000万个/毫升，可以显著减少因为充气可能造成的污染杂菌的可能，同时，迅速提高活菌量；
    四是流加小苏打溶液，原理是乳酸菌发酵产酸，而PH达到5以下后，会慢慢抑制乳酸菌自己的繁殖，Ph达到4以下时，几乎可以完全抑制乳酸菌繁殖，所以，您必须在发酵12小时后，或每12小时左右，流加一次小苏打粉，添加量为发酵液量的0.3%左右，或自己用PH计检测一下PH，提高PH到5.5以上。
    五是完善培养基营养，我们提供给养殖户的培养基（即红糖+强微水产苷）并不是完全培养基，营养是不太丰富或不太全面的，如果更有条件的话，就用乳酸菌专用的培养基来培养，例如您所说的MRS培养基；
   通过以上几点，可以达到较高的乳酸菌含量，例如可能达到10亿/毫升以上的含量；
   据我检测市场上的液态菌剂产品，实际上，大多在5亿/毫升以下，有的甚至不到1亿/毫升的，至于您所说的可能是菌株不同的原因，这也是不成立的观点，因为商业化可用的乳酸菌，几乎就是乳酸球菌类的产品，乳酸杆菌类的产品几乎是不存在的，除非他的产品全程用冷链运输和保存，即保存在冰箱冻库中，对于养殖业来说，这是不现实的；
    为了提高净水功能，以及其他功能，可以考虑添加强微靓水素一起扩培，具体可以添加强微靓水素250，配合壮肠QW100（育苗专用菌）250克，用来扩培300公斤左右的乳酸菌发酵液，或再添加强微生物脱硫剂250克（复合芽孢杆菌类，并有脱除硫化氢功能）

2、多谢钟工的解答！你的解答让我的知识面一下子宽了很多！多谢了！我还有几个问题要麻烦你。我在检测其他产品时发现它们的ph都是很低的，只有2左右。而我自己培养的ph值最低也只是3.5左右，所以我在查了你们网站上的有关文章，发现你说的是他们为了延长贮藏期，而人为的加酸。这可能也是他们不得已而为之的。只是现在的疑惑是:1加到如此之酸那不是在杀死一些活菌吗？为什么它们又能加到如此之酸？2，假如真的因为一些原因需要加酸的话，能否告诉我可以加些什么样的酸吗？(它们的化学名称)。还有一个问题，有点不好意思麻烦你:我打算就用强微产品来扩培去使用，能否帮我设计出一套操作流程，让扩培液中的活菌数达到5亿左右，并且又有比较强的净水功能吗？(即使操作相对麻烦一点也可以，因为我们公司也有一个简单的实验室)，假如这个问题你觉得不方便回复的话，我们也能理解！不过我真的诚心希望能得到你的指教！以上问题麻烦你了，多谢！

   您好，市场上大多数的液态产品PH确实是很低的，只有2左右，这其中您可以发现，越是低的PH的产品检测起来活菌也不多的，很显然，高的酸度对活菌数是有影响的，有一些产品可能是发酵时间非常长，或保存时间长，而自然下降到PH2-3的，特别低的，有的是添加了酸化剂的，有的用磷酸，有的用有机酸，但是用微生物代谢循环中的有机酸的，则对活菌的抑制作用最弱，例如使用柠檬酸，苹果酸，乳酸等，而用无机的如磷酸的杀灭作用最强，因为无机酸的渗透压最高，在强酸抑制作用下，还有使细胞质壁分离的作用，所以，要调节酸度最好是用有机酸，但有机酸也是有抑杀作用的，我们做过实验，添加柠檬酸到PH2左右，活菌在几天之内减少一半以上，但可以保存较长的时间；
   用酸来抑制活性，提高保存期，其实也是不可取的，活菌的活力受到很大的影响 ，最终使用时，并不是象说明书上所说的简单的泼洒就有最好的效果，最好还是需要加水稀释，最好再加糖活化一下更好；
   另外，含活菌量高，PH也下降得快，甚至充气条件下培养，PH下降很快，常规充气条件下，也有代谢反应产生乳酸的，且因为菌数高，产酸更快；然后就培养基营养全面的，碳氮比合理的，PH下降得快等等；
   您现在是用葡萄糖加强微水产苷来扩培发酵，这个培养基并不完全全价，PH只降到3.5也是正常的，如果用更好的培养基，如米皮糠加红糖加水来扩培，操作得好，我们有一些养殖户发酵米皮糠加红糖水，PH可以自然下降到2左右，也就是五天左右的时间就可降到2左右，但大多数养殖户还是只能降到3-4，一是时间不够，二是可能购买到假的米糠，因为米糠也是有统糠，壳糠，三七糠（混合糠）等区别的，也有掺入沸石粉的假货的（这种假货粉末比较多，加水可发现大量沸石粉因为比重大而沉淀的现象，而真正的米粉是不沉淀的），1元/斤左右的米糠是符合米皮糠的价值 的；
    您想要达到菌数高的培养液，以乳酸菌为主的，环保菌也要有的，可以这样：用一包强微豆粕发酵剂 + 一包强微生物脱硫剂 + 壮肠QW100（育苗专用菌）250克 + 精米糠（米皮糠，最好打成粉，注意假货）100公斤 + 红糖25公斤 + 强微水产苷250克 + 水400公斤；这是配方；然后培养基先加热到80度维持20分钟，消灭大多数杂菌，等冷却到40度以下时接种，用增氧泵充气，每立方米一个气石就可以，培养三天左右，就可以了；原料成本大概在1元/公斤培养液；既有大量的活菌5亿/毫升，又有发酵碳肥的作用，效果很好的；培养成本是比较高一些，但和市场上的类似产品相比，仍然是少了很多倍的成本。
   关于灭菌，如果购买到比较新鲜的米糠，或用小麦麸代替也完全是可以的，则也可以不灭菌，就生料发酵，也是完全可行的，但原料新鲜无假货的才行；同时，生料培养，也要保证培养的水温最好在25度以上才好；