中华人民共和国农业行业标准

 NY/T 798—2004

复合微生物肥料
Compound Microbial Fertilizers

2004-04-16发布                     2004-06-01实施

中华人民共和国农业部  发布

复合微生物肥料
1　范围

       本标准规定了复合微生物肥料的定义、要求、试验方法、检验规则、标志、包装运输及贮存。
本标准适用于复合微生物肥料。
2　规范性引用文件
      下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
　
GB 8170—1987              数值修约规则
GB 18877—2002          有机-无机复混肥料
GB/T 1250—1989         极限数值的表示方法和判定方法
GB/T 19524.1—2004      肥料中粪大肠菌群的测定
GB/T 19524.2—2004      肥料中蛔虫卵死亡率的测定
NY 525—2002                有机肥料
3　术语和定义
       复合微生物肥料是指特定微生物与营养物质复合而成，能提供、保持或改善植物营养，提高农产品产量或改善农产品品质的活体微生物制品。
4　要求
4.1　菌种
       使用的微生物应安全、有效。生产者须提供菌种的分类鉴定报告，包括属及种的学名、形态、生理生化特性及鉴定依据等完整资料，以及菌种安全性评价资料。采用生物工程菌，应具有获准允许大面积释放的生物安全性有关批文。
4.2　成品技术指标
4.2.1　外观（感官）：产品按剂型分为液体、粉剂和颗粒型。粉剂产品应松散；颗粒产品应无明显机械杂质、大小均匀，具有吸水性。
4.2.2　复合微生物肥料产品技术指标见表1。
                               表1               复合微生物肥料产品技术指标

4.2.3　复合微生物肥料产品中无害化指标见表2。

                                  表2               复合微生物肥料产品无害化指标

5　试验方法
5.1　仪器设备
5.1.1　生物显微镜；
5.1.2　恒温培养箱；
5.1.3　恒温干燥箱；
5.1.4　超净工作台或洁净室；
5.1.5　电子天平（或精密天平，下同）；
5.1.6　摇床；
5.1.7　蒸汽灭菌锅；
5.1.8　试验筛；
5.1.9　酸度计。
5.2　试剂
       方法中所用的试剂，在未注明其它规格时，均指分析纯（A.R.）。
5.2.1　无离子水、无菌水（或生理盐水，下同）、蒸馏水。
5.2.2　检测用培养基：根据所测微生物的种类选用适宜的培养基。
5.3　产品参数的检测
5.3.1　外观(感官)的测定
 取少量样品放到白色搪瓷盘(或白色塑料调色板)中，仔细观察样品的颜色、形状、质地。
5.3.2　有效活菌数的测定
5.3.2.1　系列稀释
       称取固体样品10 g（精确到0.01 g），加入带玻璃珠的100 mL的无菌水中(液体样品用无菌吸管取l0.0 mL加入90 mL的无菌水中)，静置20 min，在旋转式摇床上200 r/min充分振荡30 min，即成母液菌悬液（基础液）。
       用5 mL无菌移液管分别吸取5.0mL上述母液菌悬液加入45 mL无菌水中，按1:10进行系列稀释，分别得到1:1×10¹，1:1×10²，1:1×10³，1:1×10⁴……稀释的菌悬液（每个稀释度应更换无菌移液管）。
5.3.2.2　加样及培养
       每个样品取3个连续适宜的稀释度，用0.5 mL无菌移液管分别吸取不同稀释度菌悬液0.1 mL，加至预先制备好的固体培养基平板上，分别用无菌玻璃刮刀将不同稀释度的菌悬液均匀地涂于琼脂表面。
       每一稀释度重复3次，同时以无菌水作空白对照，于适宜的条件下培养。
5.3.2.3　菌落识别
       根据所检测菌种的技术资料，每个稀释度取不同类型的代表菌落通过涂片、染色、镜检等技术手段确认有效菌。当空白对照培养皿出现菌落数时，检测结果无效，应重做。
5.3.2.4　菌落计数
       以出现20~300个菌落数的稀释度的平板为计数标准（丝状真菌为10~150个菌落数），分别统计有效活菌数目和杂菌数目。当只有一个稀释度，其有效菌平均菌落数在20~300之间时，则以该菌落数计算。若有两个稀释度，其有效菌平均菌落数均在20~300之间时，应按两者菌落总数之比值（稀释度大的菌落总数×10与稀释度小的菌落总数之比）决定，若其比值小于等于2应计算两者的平均数；若大于2则以稀释度小的菌落平均数计算。有效活菌数按式（1）计算，同时计算杂菌数：
             n_m = kv₁/(m₀v₂) ×10^-8       或  n_v = kv₁/(v₀v₂) ×10^-8          …………………（1）
式中：
n_m — 质量有效活菌数，         亿/g
n_v — 体积有效活菌数，        亿/mL
    — 有效菌落平均数，         个
k — 稀释倍数
v₁ — 基础液体积，             mL
v₂ — 菌悬液加入量，          mL
v₀ — 样品量，                    mL
m₀ — 样品量，                    g
5.3.3　霉菌杂菌数的测定 
       采用马丁培养基，测定方法同5.3.2。
5.3.4　杂菌率的计算
除样品有效菌外其它的菌均为杂菌（包括霉菌杂菌）。样品中杂菌率按式（2）计算：
              m = n₁/(n₁+n)×100                                       …………………（2）
式中：
m— 样品杂菌率，              %
n₁— 杂菌数，               亿/g(mL)
n— 有效活菌数，            亿/g(mL)
5.3.5　水分的测定
       将空铝盒置于干燥箱中105 ℃±2 ℃烘干 0.5 h，冷却后称量记录空铝盒的质量。然后称取2份平行样品，每份20 g（精确到0.01 g），分别加入铝盒中并记录质量。将装好样品的铝盒置于干燥箱中105 ℃±2 ℃下烘干4 h~6 h。取出置于干燥器中冷却20 min后进行称量。水分含量按式（3）计算（结果为两次测定的平均值）：
        w = (m₁- m₂)/( m₁- m₀) ×100 …………………（3）
式中：
 w — 样品水分含量，           %
m₀ — 空铝盒的质量，           g
m₁ — 样品和铝盒的质量，       g
m₂ — 烘干后样品和铝盒的质量， g